血球試劑小編為您介紹下血細胞分析儀檢測方法之激光散射和細胞化學染色技術。
在白細胞分類上,儀器采用兩個通道進行,一個為過氧化酶檢測通道,另一個為嗜堿細胞檢測通道。
過氧化酶反應(peroxidase,POX)是血涂片染色的一個常用細胞化學染色方法,用于鑒別原始細胞與成熟的粒細胞,鑒別粒細胞與非粒細胞。染色后的細胞內無藍黑色顆粒出現為陰性反應,出現細小顆?;蛳∈铇臃植嫉暮谏w粒為弱陽性反應,出現黑色粗大而密集的顆粒為強陽性反應。過氧化物酶主要存在于粒細胞系和單核細胞系中,各類白細胞對過氧化物酶的反應是這樣的:早期的原始粒細胞為陰性,早幼粒以后的各階段都含有過氧化物酶,并隨著細胞的成熟過氧化酶含量逐漸增強,中性分葉核粒細胞會出現強陽性反應,嗜酸性粒細胞具有最強的過氧化物酶反應,嗜堿粒細胞不含此酶呈陰性反應。在單核細胞系統,除早期原始階段外,幼稚單核和單核細胞會出現較弱的過氧化物酶反應。淋巴細胞、幼稚紅細胞、巨核細胞等都為過氧化物酶陰性反應。過氧化酶檢測通道就是根據這個原理設計的,它檢測每一個通過流動計數池中的白細胞,經過激光照射所產生的過氧化酶散射光吸收率,來當然試劑和輔助試劑均進行了改良。
1)過氧化酶最強陽性的嗜酸性粒細胞;
2)過氧化酶強陽性的嗜中性分葉核粒細胞;
3)體積較大、過氧化酶弱陽性的單核細胞;
4)體積較小、過氧化物酶陰性的淋巴細胞;
5)體積大于淋巴細胞且過氧化物酶陰性的未染色大細胞,此類細胞增加提示幼稚或原始的各類細胞可能出現。
在嗜堿細胞通道中采用的檢測原理是:專用的嗜堿細胞試劑將除了嗜堿細胞以外的白細胞除去細胞膜,使其裸核化并體積變小,僅將嗜堿性粒細胞保持原有狀態,體積明顯大于其他類的白細胞。
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